Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
SEKCJAA‒KOMÓRKI
A4Obrazowaniekomórek
Hasła
Mikroskopia
świetlna
Mikroskopia
fluorescencyjna
Wmikroskopiiświetlnej,dlauzyskaniapowiększonego
obrazuobserwowanegopreparatu,wiązkaświatła
jestogniskowanazapomocąszklanychsoczewek.
Wprzypadkumikroskopiijasnegopolapreparatjest
podświetlanyodspoduwiązkąświatłaskupianąnanim
przezsoczewkękondensora.Padająceświatłopoprzejściu
przezpreparatjestnastępnieskupianeprzezsoczewki
obiektywu,dającwpłaszczyźnieogniskowejpowiększony
obraz.Preparatjestwpierwszejkolejnościutrwalanyprzy
użyciualkoholulubformaldehydu,anastępniebarwiony
odczynnikami,takimijakhematoksylinalubeozyna.
Doobserwacjiżywychkomórekwykorzystujesię
mikroskopiękontrastowo-fazową,atakżebardziejzłożoną
mikroskopiękontrastuinterferencyjno-różniczkowego.
Wmikroskopiifluorescencyjnejdoobserwacji
poszczególnychskładnikówkomórkistosujesiębarwniki
fluorescencyjne(którepochłaniająświatłoodługościfali
wywołującejwzbudzenie,anastępnieemitująświatło
emisyjneoinnejdługościfali).Wmikroskopiikonfokalnej
laserskupianapreparacieświatłoowzbudzającej
długościfaliwtakisposób,żeoświetlonazostajetylko
jegocienkawarstwa.Wiązkalaserowaprzemieszcza
sięprzezpreparat,dającserięobrazów,któresą
następnieanalizowaneiskładaneprzezkomputerwcelu
uzyskaniatrójwymiarowegoobrazupreparatu.Związki
fluorescencyjne,takiejakrodaminaifluoresceina,
mogąbyćzwiązanezprzeciwciałami,którerozpoznają
określonebiałka.Białkiemzielonejfluorescencji(GFP),
pochodzenianaturalnegozparzydełkowców(meduz),
możnaznakowaćinnebiałka.GFPwykorzystujesię
doobrazowanialokalizacjiiruchubiałekwżywych
komórkach.Oddziaływaniamiędzyjednymbiałkiem
adrugimmożnamonitorowaćzapomocąmetody
rezonansowegotransferuenergiifluorescencjipoprzez
znakowaniedwóchinteresującychobserwatora
białekróżnymifluorochromami.Bocznyruchbiałka
znakowanegofluorescencyjniemożnamonitorować,
stosującmetodęodzyskiwaniafluorescencji
pofotowybieleniu.
