Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
40
2.Ulepszaniemikroorganizmówprzemysłowych
komputerowej.Escherichiacolimożegromadzićbiałkarekombinowanedo
80%suchejmasyiprzetrwaćróżnewarunkiśrodowiskowe.Produkcjarekom-
binowanegobiałkawEscherichiacolimożebyćzwiększonaprzezmutacje,
któreeliminująwytwarzanieoctanu.
BakteriezrodzajuBacillus(zazwyczajBacillusmegaterium,Bacillussub-
tilisiBacillusbrevis)osiągająwydajnośćprodukcjibiałekssakówsięgającą
3g/l.Staphylococcuscarnosusmożewytwarzać2g/lwydzielanegobiałka
ssaków.UlepszonyproducentzbakteriiGram-ujemnychdoprodukcjibiałka
rekombinowanegozostałskonstruowanyprzyużyciuszczepuRalstoniaeu-
tropha.Podwzględemtworzeniainkluzjiukładtenokazałsięlepszyod
Escherichiacoli.Organofosfohydrolaza,białkopodatnenatworzenieinkluzji
produkowanewilościmniejszejniż100mg/lprzezEscherichiacoli,zostało
wytworzonewilości10g/lprzezRalstoniaeutropha.Innąużytecznąbakte-
riąjestPseudomonasfuorescensMB101.Tensystemwytworzył4g/lTNF-0
(czynnikamartwicynowotworów).
203020Drożdże
Drożdżetojednokomórkoweorganizmygrzybóweukariotycznych.Często
stosujesięjedowytwarzaniabiałekrekombinowanych,którychniewytwa-
rzajądostateczniedobrzekomórkiEscherichiacolizpowoduproblemów
zichskładaniemlubpotrzebąglikozylacji.Głównezaletyukładówekspresyj-
nychdrożdżyto:
1)stabilnośćgenetycznaszczepówprodukcyjnych;
2)prowadzenieprocesuglikozylacjibiałek;
3)składaniebiałek;
4)produkcjabiałekbogatychwS-S;
5)obfitywzrostkomórek(wydajnośćg/lorazplonkomórkowyg/gsubstratu);
6)szybkiwzrostnazdefiniowanychpodłożach;
7)obróbkaproduktupodobnadotakiejjakwkomórkachssaków.
Szczepydrożdżydobrzescharakteryzowanegenetycznie.Wiadomo,że
dokonująwielupotranslacyjnychmodyfikacjisyntetyzowanychbiałek.
łatwiejszeitańszewbadaniachiichzastosowaniuprzemysłowymniżkomór-
kiowadówlubssakówiłatwoprzystosowująsiędowarunkówfermentacji.
DwanajczęściejwykorzystywaneszczepydrożdżytoSaccharomycesce-
revisiaeidrożdżemetylotroficznePichiapastoris.Oksydazaglukozowa
zAspergillusnigerjestprodukowanaprzezSaccharomycescerevisiaezwy-
dajnością9g/l.Rekombinowaneproduktydostępnenarynkuwytwarzane
przezSaccharomycescerevisiaetoinsulina,antygenpowierzchniowywirusa
zapaleniawątrobytypuB,oksydazamoczanowa,glukagony,czynnikstymu-
lującykolonizacjęmakrofagówgranulocytów(GM-CSF),hirudynaipłytko-
wyczynnikwzrostu.
Pichiapastoriswykazująsilnywzrostorazindukowanąmetanolemeks-
presjęisekrecjęrekombinowanychbiałek.stosowanedokomercyjnej