Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
2.4.Izolacjamikroorganizmówprzemysłowych
43
sku,apromujedowzrostumikroorganizmyrzadkie,niepoznane,oszczególnych
cechach.Możnatakżestosowaćhodowleokresowenamnażające,wzbogacające
wpopulacjebardzorzadkielubprowadzićhodowleciągłesprzyjającenamnażaniu
sięróżnychmikroorganizmów.Sprzyjającewarunkizachęcajądowzrostuorgani-
zmydoceloweopożądanychcechachizwiększająichilośćprzedizolacjąibada-
niemprzesiewowym.Jednakżetensposóbselekcjijestodpowiednitylkowów-
czas,gdypożądanacechazapewniaprzewagękonkurencyjnąorganizmom.
Stosujesięwielerodzajówpodłoży,aleniematakiego,którebyłobyodpowiednie
dlawszystkichmikroorganizmów.Naprzykład,jeślibakteriezpróbyglebyzosta-
wysianenaagarodżywczy(pH7,0)iinkubowanewtemp.37°Cprzez24-48
godz.wyrośniejednafrakcjatlenowychmezofilnychbakterii.Zgubionezostaną
beztlenowce,termofile,alkalifileiacydofile.PowolnywzrostmezofilijakActino-
mycetes,atakżepatogennychmezofiliniejestmożliwynaagarzeodżywczym.
Jeśliwyrośniemikroorganizmwydzielającysubstancjeantybakteryjne,uniemoż-
liwiwzrostpewnychbakteriimezofilnych.Wceluzahamowaniawzrostugrzybów
dopodłożadodajesięantygrzybowyczynnik(cykloheksamidinystatynęwstę-
żeniu50-100ug/ml).DoizolacjibakteriiGram-ujemnychstosujesięagarMac-
Conkeyazawierającysolekwasówżółciowych,którehamująwzrostbakterii
Gram-dodatnich.Doizolacjibakteriisporującychpróbyprzedwysiewempod-
grzewasiędotemp.70°Cprzez10-15minwceluzabiciaformwegetatywnych
iwysiewajenapodłożeM-9zróżnymiźródłamiwęgla.Bakterietworzącestrzęp-
kirosnąnapodłożachpowoli.Najliczniejwystępująwglebachrolniczych.Ich
liczebnośćjestnajwiększawsezoniesuchym,aznaczniemniejszawdeszczo-
wym.GlebapowietrzniewysuszonaprzezkilkadnijestidealnadoselekcjiActi-
nomycetes.Tagrupabakteriirozwijasięnajlepiejnapodłożuzawierającymargi-
ninęiglicerol.Ponadtododajesiędoniegochloramfenikol(50ug/ml),nystatynę
(50ug/ml),polimyksynę(50ug/ml)ipenicylinę(100ug/ml)wceluzahamowa-
niawzrostugrzybówiinnychbakterii.
Grzybybardzoróżnorodneimająróżnewymaganiapokarmowe.Pod-
łożezawierającesubstancjeodżywczepowinnobyćwzbogaconewzwiązki
antybakteryjne,jakpenicylinę,streptomycynę,chloramfenikol,kanamycynę
itetracyklinę,wceluzahamowaniawzrostubakterii.Doizolacjigrzybów
najczęściejstosujesiępodłożePDA(PotatoDextroseAgar)orazpodłożez-
żembengalskim.
Izolacjanastępczanaodpowiednichpodłożachselekcyjnychiwokreślonych
warunkachwzrostuprowadzidopozyskiwaniaczystychszczepówrosnących
nazestalonympodłożuwzrostowym.Powyizolowaniuczystychszczepów,
każdyznichmusibyćpoddanybadaniomprzesiewowympodkątempożądanej
właściwości,produkcjispecyficznychenzymówczyprodukcjizwiązkówinhi-
bitorowych.Jednaknatymetapiepoziomaktywnościlubstężeniaproduktunie
mawiększegoznaczenia,ponieważrozwójszczepumożnaulepszaćróżnymi
technikami,abydoprowadzićdoznacznejpoprawyjegowydajności.Wybrane
izolatymusząbyćrównieżbadanepodkątemtakichważnychcech,jakstabil-
nośćszczepuoraz,wraziepotrzeby,nietoksyczność.