Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
ĆWICZENIE1–AMINOKWASYIBIAŁKA
21
cząsteczkiprzyokreślonympH.ZmianapHśrodowiskawpływanastanjonizacji
aminokwasu,peptydulubbiałkaiichfizjologicznąaktywność[3,4].
WartośćpH,wktórymwypadkowyładunekcząsteczki,peptydu,białkalub
cząsteczkiinnegozwiązkuamfoterycznegowynosizero,jestokreślanajakopunkt
izoelektryczny(pI).WroztworzepHwyższymodpunkuizoelektrycznegowypad-
kowym,dominującymładunkiemcząsteczkiaminokwasu,peptydulubbiałkajest
ładunekujemny,natomiastwroztworzeopHniższymodpunktuizoelektrycznego
dominującymładunkiemjestładunekdodatni.
Białkawśrodowiskuwodnymtworząroztworykoloidalne,awstaniezoluutrzy-
mująsiędziękiładunkowielektrycznemuiuwodnieniucząsteczki.
Rozpuszczalnośćbiałkawroztworachwodnychzależyodrodzajuirozmieszczenia
łańcuchówbocznychresztaminokwasówhydrofilowychihydrofobowych.Wroztwo-
rzeopHzbliżonymdopunktuizoelektrycznego,gdywypadkowyładunekcząsteczki
jestbliskizeru,warstwahydratacyjnajestniewielka-zwłaszczawprzypadkubiałek
hydrofobowych-iłatwonastępujeagregacjakoloidu.
Wpunkcieizoelektrycznymbiałkawykazująnajmniejsząrozpuszczalność,
najmniejszeciśnienieosmotyczneinajmniejsząlepkość.
Denaturacjabiałkajestrezultatemzniszczenianatywnejstrukturyprzestrzennej
(II-IVrzędowej),bezhydrolizywiązańpeptydowych.Najczęściejjestprocesem
nieodwracalnymiprowadzidoutratybiologicznejfunkcjibiałkaizmianwłaściwości
fizykochemicznych.Rozfałdowanełańcuchypolipeptydowewykazujątendencjędo
agregacjinaskutekoddziaływańhydrofobowych.
Doczynnikówdenaturującychnależąm.in.:wysokatemperatura,silnekwasy
izasady,rozpuszczalnikiorganiczne,detergenty,jonymetaliciężkich,promieniowanie
ultrafioletowe,wysokiestężeniemocznika.Wzrosttemperaturypowodujerozrywanie
wiązańwodorowych,spadekstabilnościcząsteczekbiałkaispadekichaktywności.
Większośćbiałektraciswojąnatywnąstrukturęwtemperaturzeokoło600C,chociaż
znanesąbiałka,którewytrzymujątemperaturybliskie1000C.
Rozpuszczalnośćaminokwasówwwodziejestzróżnicowanaizależyodhydrofilowego
lubhydrofobowegocharakteruresztyR.ZwiązkitewpIwykazująnajsłabsząrozpusz-
czalność,cojestwynikiemstosunkowomałejhydrofilowościwtychwarunkachgrupy
aminowejikarboksylowej.Wstaniestałymaminokwasytworząbezbarwnekryształy
owysokichtemperaturachtopnienia.Ichrozkładnastępujewtemperaturzeprzekraczają-
cej2000C.Wzakresieświatławidzialnegoaminokwasyniewykazująabsorpcjipromie-
niowaniaidlategoichroztworysąbezbarwne,natomiastwczęścinadfioletowejświatła
(UV)silnieabsorbująaminokwasyzawierająceukładyaromatyczne.Wszczególności-
dużawartośćmolowegowspółczynnikaabsorpcjityrozynyoraztryptofanuprzydługości
fali280nmpozwalanaspektrofotometrycznypomiarstężeniabiałkawroztworze.
Reakcjechemiczneaminokwasówsązwiązanezobecnościągrupaminowychoraz
karboksylowychisątypowedlaaminikwasówkarboksylowych.Ponadtoamino-
kwasyulegająreakcjomcharakterystycznymdlaspecyficznychdodatkowychgrup
bocznychorazukładówaromatycznych.