Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
Ogólnemetodybadaniażywności
NaClroztworu,cm3;V
2-pojemnośćkolbymiarowej,cm3;V
3-objętośćstosowanado
stałejekstrakcjicieczynacieczwspomaganą,cm3;V
ex-całkowitaobjętośćrozpusz-
czalnikówekstrakcyjnychiwody,cm3;V
end-końcowaobjętośćroztworuuzyskanego
pooczyszczeniu,cm3.
Wprzypadkuprzygotowywaniaroztworówstandardowychwpustychekstraktach
matrycowychnależyprzygotowaćwzorcetaksamojakstandardowerozpuszczal-
niki,ztąróżnicą,żezamiastczystegometanolunależyużyćekstraktówzpustych
próbek.Abyzminimalizowaćbłędyspowodowaneefektamiwywołanymimatrycą
podczaschromatografii,należywybraćpodobnetowary,jak:jabłkadopróbekjabłek,
gruszkidopróbgruszekitp.Próbkidobadańprzedichhomogenizacjąnależyzmik-
sowaćizamrożoneprzechowywaćniedłużejniż3dniwtemp.-180C.Całkowicie
lubznaczniezepsutepróbkinależyodrzucić.Wyjątkiemmogąbyćpróbkisuszone,
którychterminprzechowywanianiemożeprzekraczaćterminuichważnościpodane-
goprzezproducenta.
Próbkidobadańpowinnybyćprzygotowanetak,abyreprezentowałynajbardziej
zróżnicowaneczęścirośliny.Małeroślinytypugroszek,truskawki,należycałkowicie
zmiksowaćprzedodważaniem,azroślindużych,jakarbuzy,dynie,należywyciąć
fragmentyzawierającenajbardziejzróżnicowaneczęściroślin.Teczęściroślin,które
sprawiajątrudnośćwtrakcieichhomogenizacjinależywykluczyćzbadania.Przed
homogenizacjązwiększychowocównależyusunąćpestkiirozdrobnićje,wwyniku
uwzględniającoznaczaniemasyowocówbezmasypestek.
Rozdrabnianiewstaniezamrożonymmożeznaczącozmniejszyćstratychemicz-
nienietrwałychpróbek,aponadtozwykleskutkujemniejszymirozmiaramicząstek,
aprzeztowyższymstopniemjednorodności.Cięciepróbekiumieszczanieichprzed
rozdrabnianiemwzamrażarceułatwiaprzetwarzanie,któredodatkowomożnawspoma-
gaćiulepszaćprzezmieleniekriogenicznewtemp.poniżej00C.Wprzypadkuowoców
iwarzywotwardejskórcemieleniekriogenicznejestowieleskuteczniejszeniżmie-
leniewtemperaturzeotoczenia.Ponieważniesystemowepestycydyczęstowystępują
głównienaskórce,mieleniekriogeniczneznaczniepoprawiapowtarzalnośćwyników.
Wceluwykonaniabadaniadowirówkilaboratoryjnejnależyprzenieść10gpróbek
mokrychlub5gsuchych,uzupełnićwodądo10cm3iodczekać10min.Następnie
należydodać20cm3metanoluihomogenizowaćprzez2minuty,poczymdokolbyod-
mierzyć10cm3otrzymanejpróbki,dodaćroztworuNaCl,uzupełnićpłynemznadodwi-
rowanegoosaduiwirowaćprzy3000g.Następniedotubkifiltrującejzziemiąokrzem-
kowąnależydodać5cm3mieszankiNaClzodwirowanąciecząipo5minprzepłukać
jądichlorometanem,poczymzapomocąsprzętudoodparowywaniacieczy-ewapo-
ratora-zredukowaćdosuchapowstałyroztwór,ajegoresztęwysuszyćstrumieniem
azotu.Kolejnododać500mm3metanolu,całośćzważyćidelikatniewymieszaćwłaź-
niultradźwiękowej,unikającstratmetanolu,poczymcałośćroztworuprzefiltrować
doszklanejfiolkinapróbkidowstrzykiwań.
39
