Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
Odpornośćnieswoista
17
2.Zawiesinakomórekfagocytującychzwysiękuotrzewnowegomyszylub
zkrwiświnkimorskiej.Komórkiwysiękuotrzewnowegolubleukocy-
tykrwizawiesićwpłynieEagle3azdodatkiem10%surowicycielęcej
idoprowadzićdogęstości106kom./ml.
3.Surowicaodpornościowaprzeciwbakteryjna.
4.Surowicanormalna.
5.Dopełniacz(surowicaświnkimorskiej).
6.PłynEagle3azdodatkiem10%surowicycielęcej.
7.OdczynnikGiemsyrozcieńczony1:20wwodziedestylowanejlubbarw-
nikMansona(5gboraksuzagotowaćz2gbłękitumetylenowegoroz-
puszczonegow100mlwodydestylowanej.Przesączyćprzezbibułęfil-
tracyjną).
8.Alkoholmetylowydoutrwalaniapreparatów.
9.Silikonowanelubparafinowaneprobówkiwidalowskie.
10.Szkiełkapodstawowe(czyste).
Wykonanie
Doprobówkiwidalowskiejdodać0,5mlsurowicynormalnej,0,2mlzawie-
sinymakrofagów,0,2mlzawiesinybakteriii0,1mldopełniacza.Zawartośćwy-
mieszaćiwstawićdołaźniwodnejotemp.37oC.Po30min.inkubacjizawie-
sinęodwirowaćprzez3minutyprzyprędkości500xgiściągnąćsupernatant,
pozostawiając2kroplenadosadem.Zotrzymanejzawiesinyzrobićrozmazna
szkiełkupodstawowym,apowysuszeniuutrwalićprzezzanurzeniewalkoholu
metylowym.Po5min.preparatwysuszyćibarwićprzez10-15min.rozcień-
czonymbarwnikiemGiemsylubprzez1min.barwnikiemMansona.Prepara-
tyspłukaćwodądestylowanąiponowniewysuszyć.Wpreparatachoglądanych
wmikroskopiepodimersją,obliczyć:
-liczbękomórekfagocytujących(100fagocytów),
-liczbęsfagocytowanychbakterii.
Dodrugiejprobówkizamiastsurowicynormalnejdodać0,5mlsurowicyod-
pornościowej,inkubować,wykonaćpreparat,apozabarwieniuodczytaćindeks
fagocytarny.Obliczyćindeksopsoniczny.
Dlaocenyaktywnościneutrofilów,aszczególnieichzdolnościdowytwarza-
nianadtlenków,któresąniezbędnewprocesiezabijaniabakterii,stosujesięczęsto
testredukcjibłękitunitrotetrazoliowego(NBT).Związekten,okolorzeżółtym,
wobecnościnadtlenkówulegawkomórceredukcjidoformazanuociemnoniebie-
skimzabarwieniu.Testtenpoleganadodaniudokrwiheparynowejbłękitunitro-
tetrazoliowego.Poinkubacjiwtemp.37oCwykonujesięrozmazkrwinaszkiełku
podstawowym,barwiiobliczaliczbęneutrofilówzawierającychzłogiformazanu.
Wynikodnosisiędoogólnejliczbyoglądanychwpreparacieneutrofilów.Odse-
tekkomórekmetabolicznieczynnychuludzizdrowychwynosi9-15%.Znanesą
