Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
ĆWICZENIE1AMINOKWASYIBIAŁKA
Siarczan(VI)miedzi(II)-0,5%roztwórwodny.
Albuminabydlęca-roztwór2mg/cm3.
Glicyna-roztwór2mg/cm3.
Gotoweroztworyznajdująsięwpracowni.
SPRZĘTISZKŁOLABORATORYJNE
Probówki,statywdoprobówek.
35
WYKONANIE
Do2cm3roztworuhydrolizatukazeinydodać2cm310%NaOHorazkilkakropel
0,5%CuSO
4.Jednocześniewykonaćreakcjęzroztworemalbuminybydlęceji-jako
negatywnąkontrolę-zastosowaćroztwórglicyny.Zaobserwowaćpojawieniesię
barwy.Wynikiwpisaćnakontrolkę.
J.Wysalaniebiałek
Białkahydrolowewykazujądużepowinowactwodowodyisąwniejdobrzerozpusz-
czalne.Wwynikuoddziaływaniagruppolarnychaminokwasówzdipolamiwody
białkateotaczająsięwroztworzewarstwącząsteczekwody,tzw.warstwąhydratacyjną
(płaszczwodny).Obecnośćotoczkihydratacyjnejuniemożliwiawzajemnestykaniesię
cząsteczekbiałka,atymsamymutrudniajegowytrącanie.Wysalaniebiałkajestproce-
semkoagulacjibiałkapodwpływemdużychilościobojętnychsolitworzącychhydraty,
naprzykładsiarczanu(VI)amonu-(NH
4)
2SO
4czysiarczanu(VI)magnezu-MgSO
4.
Zjawiskotowywołanejestprzezkonkurencjęocząsteczkiwodypomiędzyjonamisoli
acząsteczkamibiałka.Naskuteksilnejhydratacjisolipłaszczwodnybiałkaulegazmniej-
szeniu,abiałkowytrącasięzroztworu.Wysalanienajczęściejniepowodujedenaturacji
białka,aprocesjestodwracalnyibiałkomożnaprzeprowadzićdoroztworupoprzez
usunięcienadmiarusoli(np.wwynikudializylubprzezrozcieńczenieroztworu).Wysa-
lanieprzebieganajłatwiejprzypHrównympIbiałka,gdyżbrakwypadkowegoładunku
elektrycznegocząsteczeksprzyjaichłączeniusięwagregaty.Stężeniesolipotrzebnedo
wysoleniabiałkajestżnedlażnychbiałekiwdużymstopniuzależyodwłaściwości
cząsteczek,zjawiskowysalaniajestszerokowykorzystywaneprzyizolacjiioczyszcza-
niubiałekobecnychwmieszaninach.Naprzykładstosującfrakcjonowanewysalanie
siarczanem(VI)amonu,możnaoddzielićglobulinyodalbumin.Tepierwszestrącająsię
przystężeniurównymokoło50%nasycenia(NH
4)
2SO
4,drugienatomiastwytrącająsię
zroztworuprzy80%nasyceniasiarczanu(VI)amonu.
ODCZYNNIKI
Białkojajakurzego-roztwór(białkojajarozpuścićw50cm3roztworusolizjo-
logicznej,roztwórprzesączyć).
Siarczan(VI)amonu((NH
4)
2SO
4)-nasyconyroztwórwodny.
Chloreksodu-0,9%roztwórwodny.