Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
12
Słodkowodneskorupiakiplanktonowe
Przedprzystąpieniemdopreparowanialubprzygotowaniapreparatuosobnikanale-
żyoczyścić,naprzykładprzezwielokrotnezasysanieiwypompowywanieokazuiwody
doizpipety.Dobrzeoczyszczarównieżglicerollubkwasmlekowy.Jednakżepodłuż-
szymczasieprzechowywaniapróbkikwasmlekowyzmiękczatkankiimożespowodować
rozpadosobnikanaczęści.Niektóresubstancjedodawanedopróbek,naprzykładśrodki
czyszcząceiprześwietlającesąhipertoniczneimogąspowodowaćzapadnięciesięosob-
nikadośrodkaponagłejutraciepłynówwewnętrznych,dlategonależywcześniejnakłuć
preparowanyokazigłąlubzanurzyćgow50%roztworzeużytegośrodka,zanimprzenie-
siesięokazdośrodkanierozcieńczonego.Abyuniknąćprzemieszczeniasięwypreparo-
wanychfragmentówosobnikapodczasprzykrywaniaszkiełkiemnakrywkowym,należy
odczekać,ażśrodekstaniesięlepki,kleisty.Należyteżzaznaczyćpozycjepreparowanych
elementównaetykietcepreparatu.Nakrywającpreparatszkiełkiemnakrywkowym,do-
brzejestumieścićkawałkipokruszonegoszkiełkalubplastelinywnarożnikach,cochro-
niokazprzedzgnieceniem,lubumieścićgonaszkiełkupodstawowymzłezką.
Jeżeliokazywymagająbarwienia,dobrerezultatydaje,wprzypadkujużutrwalo-
nychpróbeklubnajlepiejwtrakcieutrwalania,stosowanie1%roztworuróżubengal-
skiego(10gbarwnikaw1dm310%formaliny).
Dowykonaniapreparatówtrwałychstosujesięróżneodczynniki.Dobrymśrod-
kiemjestczystaglicerynalubEuparal,dającymożliwośćrozpuszczeniaw95%etanolu
nawetpodługimokresieprzechowywania.Popularniestosujesiębalsamkanadyjski,
którymożebyćrozpuszczanywksylenielubchloroformie,aleśrodektenzczasemmoc-
nociemnieje.Jakdotądnajlepszymśrodkiemjestpoliwinyl-laktofenol.Prostąmetodą
przygotowaniastałegopreparatujestutrwalenieokazuwkropliwodyzniewielkimdo-
datkiemformaliny.Kroplęwodyzokazem,znajdującąsięnaszkiełkupodstawowym,
należyprzykryćszkiełkiemnakrywkowym,naktóregorogachumieszczasięniewielkie
ilościplasteliny.Poprzykryciuszkiełkiemnakrywkowymkroplaniepowinnasięrozlać
podpowierzchniąszkiełka.Wwolnemiejscapomiędzykropląwodyzokazemabrze-
giemszkiełkanakrywkowegonależywpuścićrozpuszczoną(przezpodgrzanie)parafinę.
Pozakrzepnięciuparafinybrzegiszkiełkapowinnosięotoczyćbalsamemkanadyjskim.
Dokilkutygodniowegoprzechowywaniaokazumożnaużyć30-50%roztworugliceryny,
coskuteczniezapobiegawysuszeniu.
Obserwacjezapomocąnajnowszychelektronowychmikroskopówskaningowych
(SEM)niewymagająspecjalnegoprzygotowaniaokazu,umożliwiającnawetobserwację
unieruchomionegożywegoosobnika.Okazjestoświetlanywiązkąelektronówemitowa-
nązeźródła,którapoodbiciusięodokazuwędrujedoekranu.Pozwalatonaprowadze-
nieobserwacjizeznaczniewiększąrozdzielczością,niżumożliwiajątonajlepszenawet
mikroskopyświetlne.StarszeSEMwymagająprzepłukaniaokazuwroztworzedetergen-
tu(jednakroplaw100mlwodydestylowanej).Po30minutachokazpowinienbyćpłu-
kanytrzykrotniewwodziedestylowanejprzezpięćminutiprzeprowadzanyprzezserię
roztworówacetonuowzrastającymstężeniu(30%,50%,70%,80%,95%,100%),wcelu
odwodnienia.Okazmożeteżbyćoczyszczony25%roztworemHClprzezpodgrzanie
do930C.
