Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
A
B
RYC.1.1.9.LaserowyskanującymikroskopkonfokalnyfirmyZeiss(LSM980)wkonfiguracji
epi-(A)orazdiaskopowejwrazzinkubatoremdoprowadzeniaobserwacjiprzyżyciowych
komórek(B)(zdjęciedziękiuprzejmościCarlZeissPolskaSp.zo.o.).
czastworzeniaobrazówrealizowanajestdzię-
sokoczułakameraCCD(Ing.charge-coupled
kiobecnościprzysłonywformieotworu(Ing.
device),EM-CCD(Ing.electronmultiplying
pinhole)dopasowanegośrednicądowielkości
CCD)lubCMOS(Ing.complementarymetal
obrazudyfrakcyjnegopunktupowstającego
oxidesemiconductor).Dziękitakiejkonstruk-
wpłaszczyźnieobrazowejobiektywu(naprzed-
cjimożliwejestobrazowanieżywychkomórek
miocie).Pozaprzysłonąznajdujesiędetektor-
iprocesówwnichzachodzącychniemalwcza-
fotopowielacz,któryodbieraiwzmacniaświa-
sierzeczywistym,nietylkowformieobrazów
tłoemitowaneprzezfluoryzująceobiekty(ryc.
dwu-,aleitrójwymiarowych.
1.1.7).Wadąsystemukonfokalnegoskanujące-
Źródłemświatławskanującymlasero-
goprzedmiotskoncentrowanąwiązkąświatła
wymmikroskopiekonfokalnymjestnajczę-
wzbudzającegojestczaspotrzebnydoformo-
ściejukładkilkulaserówgenerującychświatło
waniapełnegoobrazupreparatuwosiX-Y
,
ookreślonychdługościachfal,którewspólnie
anastępniewosiZ.Znaczniewydajniejszym
pokrywającałyzakresdługościfalwpaśmie
czasowoukłademobrazowaniajestmikro-
widzialnym(od400do750nm).Obecnie
skopkonfokalnyzwirującymdyskiem(Ing.
corazczęściejlaserysąwymienianenadiody
spinningdiscconfocalmicroscope;SDCM),
emitująceświatło(Ing.lightemittingdiode;
choćzdolnośćrozdzielczategoukładujestnie-
LED).Wmikroskopiekonfokalnymzwiru-
znaczniegorszaodmikroskopukonfokalnego
jącymdyskiemoświetlenieprzedmiotujest
skanującego.Najczęściej,dwakomplementar-
realizowanepodobniejakwmikroskopieflu-
nezesobą,szybkowirującedyski,majązaza-
orescencyjnym,najczęściejlampąksenonową.
danieskupiaćświatłoemitowanezprzedmiotu
Cyfroweobrazyotrzymywanewmikro-
(pierwszydysk)naszereguprzysłonotworko-
skopachfluorescencyjnychorazkonfokalnych
wychkolejnegodysku(dyskNipkowa).Detek-
mogąbyćdalejfiltrowane,abywyeliminować
toremświatłafluorescencyjnegojesttutajwy-
niepożądanesygnałyświetlne,będąceefektem
1.1Instrumentyoptyczne–mikroskopyświetlne,elektronoweiinne
9
