Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
2.1.Dobórmikroorganizmówstosowanychwbiotechnologii
sacharoza(12g/100cm
3),atakżeroztworyinnychzwiązków(dekstranu,glutaż
minianusodu).
Wprocesieliofilizacjimożnawyróżnićdwaetapy.Wpierwszymznich
zawiesinękomórekrozlanąpook.0,5cm
3d
oszklanychfiolekpoddajesięzaż
mrażaniu,wdrugimzaśwwarunkachpodciśnienia(0,1j0,01Pa)następujesubż
limacjawody.Zalecasiępowolnemrożenie
,
wtempieok.1OC/min
,
lubbardzo
szybkie
,
wynosząceok.1000OC/min.Maksymalneograniczeniedostęputlenu
,
którywywierawtychwarunkachefekttoksycznywstosunkudokomórek
,
możnauzyskaćprzezszybkieprowadzeniewszystkichoperacjipomiędzyetaż
pemzamrażaniaasublimacją.Probówkipoddaneliofilizacjizatapiasiępróżż
niowo.Jeśliwewnątrzzatopionychprobówekistniejepróżniaorazzawartość
wodynieprzekracza1%,toistniejemożliwośćdługotrwałegoprzechowywania
komórekzzachowaniemichżywotnościicechtechnologicznych.
Kulturyutrwalonemetodąliofilizacjiprzechowujesięwpomieszczeniu
otemperaturzeponiżej5OC.Wdługoterminowymprzechowywaniuszczepów
liofilizowanychwskazanejestichprzetrzymywaniewzamrażarkachwtempeż
raturzeodj20OCdoj70OC.
Suszenie czystych kultur
Najprostszymsposobemutrwalaniadrobnoustrojówjestsuszeniehodowlibezż
pośrednionapodłożuwzrostowym.Metodętęzpowodzeniemstosujesięwutrważ
laniugrzybówstrzępkowych
,
któreobficiezarodnikują.Hodowlęnaskosiezoż
stawiasięażdocałkowitegowysuszeniazarównopodłoża
,
jakisamegogrzyba.
Takuzyskanesuchekonidiamogąutrzymaćdużążywotnośćnawetprzezkilka
lat.Modyfikacjątejmetodyjestsuszeniepróżnioweweksykatorzezumieszż
czonąwnimsubstancjąhigroskopijną(np.P2O5),wtemperaturzepokojowej.
Zawiesinydrobnoustrojówwroztworzeochronnymponaniesieniunanośnik,
którymjestnp.piasekkwarcowy
,
kulkilubpierścienieszklane
,
paskibibuły
,
suszysięweksykatorzewwarunkachpróżniowych.Takzabezpieczoneszczepy
drobnoustrojów
,
przechowywanewtemperaturze+4OCbezdostępuwilgoci
,
mogązachowywaćżywotnośćnawetprzezkilkalat.
Wielemikroorganizmów
,
wtymprzedewszystkimtworzącychspory,np.
grzyby,szczepyzrodzajuStreptomyces
, możnautrwalaćprzezsuszeniesporna
powierzchniobojętnychnośników
,
takichjak:piasek
,silikażellubkulkiszklane
,
lubporcelanowe.Nośnikipoprzemyciuwprowadzasiędoprobówek
,
którepo
sterylizacji(121OCwciągu30min)suszysięwtemp.25OC.
Wsuszeniuzwykorzystaniempiasku
,
1cm
3
gęstejsuspensjispordanego
szczepudodajesiędo5gsterylnego,suchegopiaskukwarcowego.Całośćmież
szasięwprobówce
,
którązamykasiękorkiemzwatyiprzetrzymujewpoż
mieszczeniuotemp.25OCażdowysuszenia.Utrwalonewtensposóbgrzyby
Penicillium chrysogenummożnaprzechowywaćwciągukilkulatwtemperatuż
51
