Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
Mutacjegenowe
Wceluocenydziałaniamutagennegobadasięmutacjegenowe(punktowe).
Mutacjetepolegająnazmianiesekwencjinukleotydówwgenie.Możnaje
wykrywaćzapomocątestumutacjipowrotnychnaodpowiednioprzygotowa-
nychszczepachSalmonellatyphimurium.Szczepyteniemajązdolności
syntezyhistydynyinapodłożupozbawionymtegoaminokwasusięnie
rozwijają.Wobecnościksenobiotykubędącegomutagenemszczepyte
powracajądoformywyjściowej(mutacjapowrotna)imogącsyntetyzować
histydynę,rozwijająsię(wyrastająkolonierewertantów)przybrakutego
aminokwasuwpodłożu.Liczbakoloniirewertantówjestmiarąsiłydziałania
mutagennego.
Badaniemutacjigenowychmożnatakżeprowadzićinvitro,wykorzystując
odpowiednieliniekomórkowe,np.chłoniakamyszylubkomórkijajnika
(CHO)ipłuc(U79)chomikachińskiego.Ocenadziałaniamutagennegojest
opartam.in.nazmianachwgenachkodującychniektóreenzymy.Naprzykład
wkomórkachzawierającychfosforybozylotransferazęhipoksantynowo-guani-
nową(HGPRT)toksyczneanalogipuryny(np.6-tioguanina)wbudowująsiędo
DNAikomórkaobumiera.Przeżywajątylkotekomórki,którenaskutek
mutacjiniemająenzymuHGPRT.
Aberracjechromosomowe
Aberracjechromosomowe,będącewynikiempoprzecznego,,złamania”chro-
mosomuiponownegopołączeniafragmentówwczasiecyklukomórkowego,
prowadządozmianwukładziegenów.Czynnikiwywołujące,,złamanie”
chromosomu(duplikacja,inwersja,translokacja)toklastogeny.Dooceny
aberracjichromosomowychstosujesię:
cytogenetycznebadanieszpikukostnegoinvivoussakówwmikroskopie
oceniasięstrukturalneaberracjechromosomowe;
testmikrojądrowyopartynawzrościeczęstościwystępowaniapoli-
chromatycznycherytrocytówzawierającychmikrojądra;badasięprepara-
tyszpikukostnegozwierząteksponowanych;
testdominującychmutacjiletalnychpolegającynaindukowaniudominu-
jącejzmianyletalnejpoekspozycjisamcównaksenobiotykiskojarzeniu
ichzsamicami;określanajestliczbaimplantóworazżywychimartwych
płodów.
UszkodzeniaDNA
BadaniauszkodzeńDNAprowadzisięzapomocątestówoceniających:
uszkodzenieDNAoraznaprawę/nieplanowąsyntezęDNAwkomórkach
ssakówinvitroodpowiedziąkomórkinauszkodzenieDNAjest
enzymatycznanaprawa,czylinieplanowasyntezaDNA(wodróżnieniuod
planowej,którazachodziwnormalnymcyklukomórkowym)powodująca
46
2.TOKSYKOMETRIA