Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
30
Proteomikaimetabolomika
płytka
laser
białko
łącznik
widmoMS
matryca
identyfikacjazwiązanychbiałek
Rys.4.3.Macierzebiałkoweiproceduraidentyfikacjiskładnikówpróbki
wujesięmacierzeligandów,dziękiwysokiemupowinowactwubiałkadoprze-
ciwciała,receptora,ligandalubinhibitorazwiązanegonanośnikustacjonarnym.
Narysunku4.3przedstawionomacierzbiałkową(przeciwciała)immobilizowaną
napłytce.Składnikipróbkinałożonejnapłytkęreagujązeswoistymiprzeciwcia-
łami,apozostałekomponentyzostająodmyte.Związanecząsteczkiwykrywasię
zapomocąreakcjienzymatycznej,fluorescencji,spektrometriimas,itp.Wszcze-
gólnościmetodatamapotencjalnezastosowaniedomonitorowaniaokreślonych
cząsteczek,np.wdiagnostyceklinicznej.
Chromatografiapowinowactwajesttechnikąszczególnieprzydatnądousu-
waniabiałekonajwiększychstężeniach(surowica,osocze,płynmózgowo-rdze-
niowy),maskującychpozostałeskładniki.Dostępnesąkomercyjniekolumnychro-
matograficznezawierająceprzeciwciałaeliminującekilkanaściepodstawowych
białeksurowicy(m.in.albumina,immunoglobuliny).Wadątechniki,np.podczas
badańosocza,jestto,iżusunięcie(szczególniealbuminy)powodujejednocześnie
eliminacjękilkuinnychskładnikówkrwi(białka,peptydy,kwasytłuszczowe),
którewiążąsięnaturalniezalbuminą.Tozkoleimożezaburzyćilościowepro-
porcjepomiędzyposzczególnymielementamipróbki(patrzrozdz.13).
6.Wyrównywaniestężeń(ang.equalizer)–metodatzw.Hdemokratycznego”
proteomu,wktórymwszystkiebiałkasąwtychsamychstężeniach,wprowadzo-
naniedawno,aprzedstawiająrysunek4.4.Polegaonanawykorzystaniuadsorp-
