Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
4.Przygotowaniemateriałubiologicznegodoanalizy
33
-
Rys.4.7.Zasadaprzygotowaniapolimerówzpamięciąkształtu
rymabyćoczyszczony.PojejwypłukaniupolimerzawieraHwolnemiejsca”,
którewprocesieekstrakcjiwiążą–nazasadziepowinowactwa,podobnegojak
wprzypadkuprzeciwciał–związekprzeznaczonydooczyszczenia.Jeśliprób-
kazawierazwiązekprzeszkadzającywekstrakcji,trudnydousunięciainnymi
metodami,oznanejstrukturze,MIPmożebyćteżskutecznymsposobemjego
usuwania.MetodęMIPstosujesięnajczęściejdoekstrakcjizwiązkówdrobno-
cząsteczkowych.
NowątechnikąekstrakcjizwiązkówjestpochodnaSPE–mikroekstrakcjado
fazystacjonarnej(SPME,ang.solid-phasemicroextraction),któraumożliwiazagęsz-
czanie,odsalanieiwstępnąseparacjęzarównopróbekciekłych,jakigazowych
wbardzomałychobjętościach.SPMEobejmujedwapodstawoweetapy:
1.Adsorpcjasubstancjiobecnejwanalizowanejpróbcedoanalogicznejjak
wprzypadkukolumnykapilarnejwGC–warstwyadsorbentu(np.wymieniacz
jonowylubukładodwróconychfaz).
2.Przeniesienieanalizowanejsubstancjidoodpowiedniegosystemuwprowa-
dzaniapróbki(gazowegobądźciekłego),wktórymnastępujedesorpcjasubstancji
bezpośredniodostanugazowegolubciekłego.
OgromnązaletąSPME,wporównaniuzSPE,jestznaczneograniczeniezuży-
ciarozpuszczalników,małapowierzchniaadsorpcyjnawpostaciwłóknapokry-
tegomateriałemodużejpowierzchnisorpcyjnejorazkompatybilnośćzukładem
wprowadzaniapróbkion-line.Podstawowąróżnicątejmetody,wporównaniu
zopisanąwcześniejtechnikąSPE,jestprocesadsorpcjipróbkinapowierzchni
włókna,aniewkolumience,cozapewnialepsząwydajnośćodzyskaniapróbki,
znaczniemniejsząobjętośćiwyższączułośćanalizy.
Dooczyszczania,odsalaniaizatężaniabardzomałychilościpróbek(do200Ml)
wydajnąibardzoszybkąmetodąsąkolumnymicrospin(rys.4.8).Wkolumience
znajdujesięodpowiedniafazastacjonarna(np.C18),naktórąnanosisiępróbkę,
poczymkolumnępoddajesiękilkukrotnemuwirowaniu.Zanieczyszczeniame-
chanicznewpróbceniesąprzepuszczaneprzezzłoże.Podczaskolejnychwiro-
wańeluujesiępożądanebiałka.Kolumnymicrospinsąszczególniepomocne,gdy
wpróbceznajdująsiębardzomałeilościsubstancjiichcemyjezidentyfikowaćza
pomocąspektrometriimas.