Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
Biotechnologiadrobnoustrojówwlaboratoriumiwpraktyce
C0Stabilizacjadrobnoustrojównadrodzeimmobilizacji
Materiałyipodłoża
1.Drobnoustrój:Saccharomycescerevisiae.
2.Podłoża:brzeczkasłodowa12IBlgi8IBlg.
3.
Odczynniki:alginiansodowy,karagenan,0,2Mroztwór
CaCl
2
.
Celćwiczenia
Porównaniezdolnościfermentacyjnejwolnychkomórekdrożdżyorazdrożdży
unieruchomionychwżelachi
Wykonanie
1.ImmobilizacjakomórekS.cerevisiaewalginianie.
a)
48-godzinnąhodowlęwstrząsanąS.cerevisiae
w12IBlgbrzeczcesłodowejodwirowaćodpodłoża,
przemyćroztworemjałowejsolifizjologicznejipo-
nownieodwirować.Osaddrożdżydokładnierozprowa-
dzićwjałowejwodziedestylowanej(w0,1pierwotnej
objętości).Wuzyskanejzawiesiniepoliczyćkomórki
drożdżywkomorzeThomaipodaćichgęstośćwprze-
liczeniuna1mlimmobilizatu.Osaddrożdżyuzyskany
zhodowlipodzielićna2równeczęści;
b)przygotować4%jałowyroztwóralginianusodowego;
c)
wstosunkuobjętościowym1:1zmieszaćzawiesinę
drożdżyzroztworemalginianu;
d)
zawiesinękomórekwalginianieumieścićwjałowejstrzy-
kawcezigłąośrednicy1mmizprzyciętymkońcem;kro-
plamiwprowadzaćzawiesinędojałowego0,2MCaCl
2
.
Pozostawićkulkiwroztworzeprzez20min.Utwardzone
kulki2razyprzemyćjałowąwodądestylowaną;
e)
kulkiumieścićwkolbiezawierającej100ml8IBlgbrzecz-
kisłodowej;kolbęprzenieśćdocieplarkiotemp.28IC;
f)
przeprowadzićidentycznąpróbęfermentacyjnązwol-
nymikomórkamiS.cerevisiaeprzytakiejsamejwyj-
ściowejgęstości;
48
