Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
1030Metodyoczyszczanfiakwasównuklefinowych
17
103020+ydrolfizachemficznakwasównuklefinowych
Degradacja(hydrolizachemiczna)zachodzipodwpływemstężonych
kwasów(DNAiRNA).
-mrówkowego(HCOOH)wtemp.1750C9przez30min9
-chlorowego(V)(HClO3)9
-chlorowego(VII)(HClO4)wtemp.1000Cprzez1godz.
wtemperaturze1000CprzezgodzinęhydrolizieulegawiązanieN-glikozydowe
międzypurynąapentozą.Uwalnianesąwolnepurynyikwasapurynowy.
Dalszahydrolizaprowadzidorozpaduwiązaniaestrowegomiędzypentozą
aresztąkwasufosforowego9wefekcieczegouwalnianyjestcukierifosforan.
Następniehydrolizieulegająwiązaniafosfodiestrowemiędzynukleotydamiza-
wierającymizasadypirymidynowe.Pełnahydrolizaprowadzidorozpaduwią-
zańN-glikozydowychmiędzyzasadamipirymidynowymiapentoząiwiązań
estrowychmiędzytymcukremafosforanem.
-zasad(RNA)9hydrolizieulegająjedyniewiązaniaC-3V95V-fosfodiestrowemiędzy
fosforanemagrupąhydroksylową(-OH)wRNA.
PoszczególneskładnikihydrolizyDNAmożnaoznaczyćprzezzastosowanie
typowychdlanichreakcjibarwiących9opisanychwchemiiorganicznej.
-wykrywanierybozy(reakcjaBiala)-wwynikuogrzewaniapentozzkwasem
solnympowstajefuran9którynastępniereagujezorcynąwobecnościchlorku
żelaza(II)itworzykompleksozielonejbarwie;wtychwarunkachdeoksyrybo-
zareagujeokoło10razysłabiejodrybozy
CHO
+
H
O
CH3
OH
O
furfural
orcyna
H
O
CH3
O
O
CH3
OH
barwnykompleks
-wykrywaniedeoksyrybozy(reakcjaDischego)-deoksyrybozadajeniebie-
skiezabarwieniezdifenyloaminą>1.61]9cojestwynikiempowstawaniaalde-
hyduȦ-hydroksylewulinowegozdeoksyrybozywwynikudziałaniakwa-
susiarkowego(VI)(H2SO4)ioctowego(CH3COOH)9którynastępnieulega
kondensacjizdifenyloalaniną9wwynikuczegopowstajeniebieskiprodukt
