Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
20
SEKCJAA‒KOMÓRKI
Mikroskopia
elektronowa
Tematypokrewne
Wmikroskopiielektronowejwiązkaelektronówjest
ogniskowanaprzezsoczewkielektromagnetyczne.
Preparatjestumieszczanywpróżni,przezcoelektrony
niesąabsorbowaneprzezatomywpowietrzu.
Wtransmisyjnejmikroskopiielektronowejwiązka
elektronówprzepuszczanajestprzezcienkiskrawek
preparatu,któryzostałwybarwionymetalamiciężkimi.
Metaleodużejgęstościelektronowejrozpraszająpadające
elektrony,tworzącwtensposóbobrazpreparatu.
Wskaningowejmikroskopiielektronowejpowierzchnia
całegopreparatujestpokrywanawarstwąmetalu
ciężkiego,anastępnieskanowanawiązkąelektronów
wceluuzyskaniatrójwymiarowegoobrazupreparatu.
(A2)Komórkieukariotyczne
(C4)Immunodetekcja
(B6)Przeciwciała
(E2)Budowabłon
Mikroskopiaświetlna
Wmikroskopiiświetlnejużywanesąszklanesoczewkidoogniskowaniawiązki
światłanabadanympreparacie.Światłopoprzejściuprzezpreparatjestskupiane
przezinnesoczewkiwceluotrzymaniapowiększonegoobrazu.
Standardowostosowanesąróżnerodzajemikroskopiiświetlnejdlabadaniaroz-
maitychaspektówbudowykomórki.Najprostsząjestmikroskopiajasnegopola,
wktórejpreparatjestpodświetlanyodspoduprzezźródłoświatławpodstawie
mikroskopu(rys.1),przyczymświatłojestogniskowanewpłaszczyźniepreparatu
przezsoczewkikondensora.Padająceświatłopoprzejściuprzezpreparatjest
wychwytywaneprzezsoczewkiobiektywuiskupianewpłaszczyźnieogniskowej,
dającpowiększonyobraz.Obraztenjestdalejpowiększanyprzezsoczewkęokularu
aostatecznepowiększenieuzyskujesiępoprzezzsumowaniepowiększeńdawanych
przezposzczególnesoczewki.Dlazwiększeniarozdzielczościosiąganejwmikro-
skopieświetlnympreparatjestczęstopokrywanyolejkiemimersyjnym,wktórym
umieszczanesąsoczewkiobiektywu.Granicarozdzielczościmikroskopiiświetlnej
zzastosowaniemświatławidzialnegowynosiwprzybliżeniu0,2Pm.
Utrwalanieibarwieniepreparatów
Wmikroskopiijasnegopolapreparatyprzedobserwacjąsązwyklewpierwszej
kolejnościutrwalaneroztworemzawierającymalkohollubformaldehyd.Związkite
denaturująbiałka,awprzypadkuformaldehydupowodująpowstaniekowalencyj-
nychwiązańpoprzecznych(sieciowanie)międzygrupamiaminowymisąsiadują-
cychcząsteczek,costabilizujeoddziaływaniabiałko-białkoibiałko-kwasynuklei-
nowe.Utrwalonypreparatmożebyćnastępniezatopionywwoskuparafinowym
