Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
24
Proteomikaimetabolomika
Oilepobieranieiprzechowywaniemateriałuzwierzęcegoiroślinnegomożna
wstosunkowoprostysposóbkontrolować(procedurapobieraniapróbek,prze-
chowywania,itd.),otylepoważneproblemywystępująwwypadkupobierania
materiałuludzkiego.Zazwyczajpróbkę(płynustrojowy,tkanka)pobierasiępoza
laboratoriumitamprzechowuje,amożliwościnadzorutychprocedursąniewiel-
kie.Ztegowzględuzalecasięszczególnąostrożnośćwinterpretacjiuzyskanych
wyników,ponieważmogąbyćoneobarczonebłędamispowodowanymiwłaśnie
sposobempobieraniamateriału.Przykłademjesttupobieranietkanekodosób
zmarłychwwypadkachdrogowych,gdymateriałmożnauzyskaćdopieropokil-
kugodzinachinajczęściejwniewłaściwychwarunkachprzechowywania.Róż-
nicewbadanymmaterialemogąbyćtakżezwiązanezczasemjegotransportu,
temperaturąotoczeniaitp.,znaczącowpływającnapowtarzalnośćoznaczeń.
Cechycharakterystyczneposzczególnychpróbekwrazzespecyfikąprzygoto-
waniawstępnegozawieratabela4.1.
4.3.Któreskładnikibadanejpróbkisąważne?
Jednązgłównychprzeszkódzwiązanychzanaliząpróbkibiologicznejsąogrom-
neróżnicestężeńwystępującychwniejbiałek.Naprzykład,wsurowicykrwi
znajdujesię12rodzajówbiałekorganizmu,stanowiącychponad96%wszystkich
rodzajówbiałek,aróżnicastężeńmiędzynimimożewynosićokoło1x106.Pozo-
stałe4%białektoskładnikinajbardziejistotnedladiagnostyki.Białkawystępujące
wznacznejilościimaskującezmianynapoziomieznaczniemniejszychstężeń
powinnybyćusuniętewdalszychbadaniach.Możnatoosiągnąćzapomocąm.in.
chromatografiipowinowactwa,odpowiednichtechnikseparowania,frakcjono-
wania,lubwzbogacaniazwiązkówomałymstężeniuwpróbce(ang.equalizer;
patrzniżej).Ponadtonależypamiętać,żeobecnośćorazstężeniebiałekwkomórce
możesięznacznieróżnićwzależnościodstanuifazyjejrozwoju.Jesttowynikiem
różnicowaniasiękomórekorazodpowiedzinabodźcezewnętrzne.Tozkoleipo-
winnobyćuwzględnionewplanowaniuprocedurpobieraniapróbek.
Odpowiadającnapytaniepostawionewtytuleniniejszegoparagrafu,możnajedy-
niestwierdzić,żewszystkiebiałkasąważnedladiagnostyki.Problempolegajednak
natym,żewiększościznichniejesteśmywstanieprzeanalizowaćwmieszaninie.
4.4.Zanieczyszczenia–podstawowyproblemanalityka
Zanieczyszczeniapróbkipowstająnajczęściejpodczasjejprzygotowaniadoanali-
zy.Wczasiepobieraniamateriałubiologicznegozorganizmówżywych(zwierzę-
ta)mogąpowstawaćzanieczyszczeniaelementamikrwi.Głównymdodatkowym
składnikiem,najczęściejobserwowanymwpróbce,jesthemoglobina.Nieuważna
preparatykaprowadziteżdozanieczyszczeńkeratynami,znajdującymisięprak-
tyczniewszędziewlaboratorium.Ztegopowodupreparowaniepowinnosięod-
bywaćwkomorachlaminarnych.
Dodatkowymczynnikiem,mogącymznaczącowpłynąćnailośćodzyskane-
gomateriału,jestrodzajprobówek.Wskazanejestprzetestowaniedostępnych
