Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
Możetosugerować,żedalszebadaniazwiązkówgene-
rowanychelektrochemiczniepozwoląnaidentyfikację
icharakterystykęnowychodmiandlaoksysteroli[36-38].
WbadaniachproteomicznychtechnikęEC-MS
możnawykorzystaćdo:oksydacyjnegocięciapeptydów
ibiałek,redukcjimostkówdisulfidowych,znakowania
określonychresztaminokwasowych(główniecysteiny)
zelektrogenerowanymi,reaktywnymizwiązkami.Dużą
zaletątejmetodyjestto,żemożnauzyskaćmodyfikacje
biomolekuł,omijającpracochłonnąobróbkęenzyma-
tyczną,długieczasyinkubacjilubetapyoczyszczania
iekstrakcji.Bezpośredniemonitorowanieutleniania
peptydówibiałekjestbardzoważnezewzględunarolę
orazmechanizmuszkodzeńoksydacyjnych,któreczę-
stoprowadządoróżnychschorzeń.Mostkidisulfidowe
zwiększajązłożonośćwyjaśnianiastrukturybiałekprzez
MS.Wykazano,żeredukcjaelektrochemicznastanowi
szybkąiskutecznąalternatywędlacięciawiązańdisulfi-
dowychzzastosowaniemwproteomice.Celembadania
byłaelektrochemicznaredukcjawiązańdisulfidowych
dostępnegokomercyjnieprzeciwciałamonoklonalne-
go(mAb)imonitorowaniebadaniapoprzezpołączenie
on-linedospektrometrumaswyposażonegowźródło
jonówtypuESIorazwanalizatorrezonansucyklotro-
nowegoztransformacjąFouriera(ESI-FTICR-MS).
Wtensposóbmostkidisulfidowezostałyzredukowane,
nacowskazujeutworzeniesięłańcuchówlekkichicięż-
kich,którezwiększąselektywnościąmożnazbadaćza
pomocąspektroskopiimas.Pozaredukcjączterechmię-
dzyłańcuchowychwiązańdisulfidowychmożliwebyło
równieżzmniejszeniewiększejliczbywewnątrzłańcu-
chowychwiązańdisulfidowych[36-38].
ZastosowanieEC-MSwgenomicemazwiązekzutle-
nianiemkwasównukleinowychoraztworzeniempoten-
cjalnychproduktówprzyczyniającychsiędopowstawania
stresuoksydacyjnego,atakżezformowaniemsięadduk-
tówDNA.Przeprowadzonebadaniadotyczyłysieciowa-
niaguaninyzapomocątyrozynyiglutationuprzyzasto-
sowaniureaktoraelektrochemicznegowpołączeniuze
spektrometremmaswtrybieon-line(EC-ESI-MS)zjoni-
zacjąESIwtrybiejonówdodatnichzapomocąanalizatora
FTICRowysokiejrozdzielczości[36-38].
Jednaktowmetabolomicetechnikatajestobecnie
najszerzejwykorzystywana.MetodaEC-MSjestszczegól-
nieprzydatnadonaśladowaniareakcjibiotransformacji
orazbadaniawłaściwościredoksmałychcząsteczekbio-
organicznych.Licznepublikacjewskazują,żenajczęściej
stosujesięwcelusymulacjimetabolizmuleków.Ze
względunamnogośćwykorzystywaniatejtechniki,przy-
kładowezastosowaniazamieszczonowtabeli1.4[38-46].
TABELA1040PrzykładowezastosowanieEC-MSwsymulacjimetabolizmuleków
Warunki
elektrochemiczne
Elektroda
pracująca
Związek
Technikaanalityczna
Metimazol
EC-ESI-MS
Lekw20%metanoluoraz
80%20mmolllbuforu
mrówkowego(pH2,75);
w20%metanoluoraz
80%50mmolllbuforu
fosforanowego(pH7,4);
w20%metanoluoraz80%
20mmolllbuforuamono-
wego(pH10,2);szybkość
przepływu10pllmin
GC
Zidentyfikowane
produkty
elektrochemiczne
Piśmien-
nictwo
Metimazolowy
kwassulfenowy,
metimazolowy
kwassulfinowy
imetimazolowy
kwassulfonowy
[38]
Zastosowanieelektrochemiiorazspektrometriimaswnaukach„-omicznych”
15