Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
26
SEKCJAA‒KOMÓRKI
białek,wirusówiwewnątrzkomórkowychorganelli.Przestrzenneobrazystruktur
zrozdzielczością2-10nmmożnauzyskaćprzyzastosowaniutechnikitomografii
elektronowej,którapozwalajewygenerowaćpoprzezanalizękomputerowąlicz-
nychdwuwymiarowychobrazówuzyskanychwróżnychkierunkachoglądania.
Mikroskopiakrioelektronowa,wktórejanalizowanepróbkisągwałtowniezamra-
żanewbardzoniskichtemperaturach,jestwykorzystywanadlaokreślaniastruktur
przestrzennychbiałek(patrztematB2).
Przeciwciałamożnaznakowaćelektronowogęstymicząstkamizłotawpodobny
sposób,jaksąznakowanefluorescencyjnymbarwnikiemwmikroskopiifluorescen-
cyjnej.Wtedymogąbyćwiązanedospecyficznychbiałekdocelowychwcienkim
skrawkupreparatu.Podczasoglądaniawmikroskopieelektronowymnaobrazie
widocznesąmałeciemneplamyspowodowanecząsteczkamizłotawszędzietam,
gdziecząsteczkaprzeciwciałazwiązałasięzeswoimantygenem(patrztematC4).
Dlategotechnikatamożebyćwykorzystywanadolokalizacjiokreślonychbiałek.
Wskaningowejmikroskopiielektronowejpreparat(bezcięcianaskrawki)jest
utrwalanyipokrywanycienkąwarstwąciężkiegometalu,takiegojakplatyna.
Następniewiązkąelektronówomiatasię(skanuje)preparat,wzbudzajączawarte
wnimcząsteczki,któreuwalniająwtórneelektrony.Tewtórneelektronysąskupiane
wdetektorzeiwyświetlasięotrzymanyobraz(rys.4b).Skaningowamikroskopia
elektronowawytwarzaprzestrzennyobraz,ponieważliczbaelektronówwtórnych
wytwarzanychprzezdowolnypunktpreparatuzależyodkątapadaniawiązkielek-
tronówwzględempowierzchnipreparatu.Rozdzielczośćmikroskopiiskaningowej
wynositylkookoło10nm.
