Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
C–MIKROBIOLOGIA
C4.Badanieliczby
drobnoustrojów
Podstawowepojęcia
Otrzymywanie
czystejkultury
Analizaliczby
drobnoustrojów
Zagadnienia
powiązane
Dlawielubadańzdziedzinymikrobiologiikluczowejest
pojęcieczystejkulturyokreślonegogatunkuprokariotycznego.
Otrzymujesięjązregułyzapomocąposiewuredukcyjnego
napłytceagarowej,któryskutkujepowstaniempojedynczych
kolonii,lubteżpoprzezrozcieńczaniehodowliwpodłożu
sterylnymdomomentu,ażmożliwebędzieuzyskanie
hodowlizpojedynczejkomórki.
Wkontekściestandardówprzemysłowych,żywnościowych
imedycznych,jakiwbadaniachmikrobiologicznych
ważnejestpojęcieliczbybakteriiwmililitrzepróbki.
Możnająwyrazićjakołącznąliczbęwszystkichkomórek
żywychimartwychlubliczbężywychkomórek.Łączną
liczbękomórekmożnaobliczaćzapomocąhemocytometru
lubmetodamipośrednimi,takimijakilościowaPCR
(qPCR),aleokreślanieliczbykomórekżywychstanowi
większyproblem.
Klasycznymimetodamiokreślanialiczbykomórekżywych
sąseryjnerozcieńczeniaiobliczaniejednostektworzących
kolonię(jtk;ang.cfu-colonyformingunit)oraztechnika
najbardziejprawdopodobnejliczby(MPN,ang.mostprobable
number).Zostałyoneudoskonalonedziękiwykorzystaniu
technikbiochemicznychimolekularnych,takichjak
ilościowaPCRzodwrotnątranskrypcją(qRT-PCR)
iokreślanieliczbyATP(adenozyno-5’-trifosforanu).
Jednymznajprecyzyjniejszychsposobówustalania
stosunkukomórekżywychdokomórekmartwych
jestwykorzystywaniebarwnikówfluorescencyjnych
isortowaniekomóreknapodstawiefluorescencji
(FACS,ang.fluorescence-activatedcellsorting).
C5.Obserwacjadrobnoustrojów
