Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
16
10KwasynuklefinoweDNARNAļkluczedosyntezybfiałek
103010DenaturacjatermficznaDNA
DenaturacjaDNA(przejścieheliswkłębek)poleganazniszczeniustruktury
dwuniciowej(helisy)DNA.Wwynikutegoprocesunastępujerozplątaniepodwój-
nejhelisywskutekzerwaniawiązańwodorowychmiędzyłańcuchamipolinukle-
otydamibezzmniejszaniastopniapolimeryzacji(rys.1.8).Jesttoprocesbardzo
szybki.DNAomasierzędu108Daulegadenaturacjicząsteczkowejwciągu
ok.1min.
Rozdzielonenicipolinukleotydoweprzyjmująkonformacjękłębkową9
wktórejłańcuchymajądużągiętkośćiswobodnepołożeniewzględemsiebie.
RozplątanenicikopiowaneprzezenzympolimerazęDNA-Tag.Denatura-
cjęmożnaprzeprowadzić9ogrzewającroztwórDNApowyżej900C.Poponownym
ochłodzeniuroztworurozdzielonełańcuchyDNAulegająrenaturacji(reasocja-
cji)9odtwarzającstrukturędwuniciową.Jesttoprzejściekonformacyjnekłębek-
helisa9zachodzącewsposóbkooperatywny.
RenaturacjaDNAuwarunkowanajestprocesemdyfuzji9któryokreślapraw-
dopodobieństwospotkaniasiędwukomplementarnychniciDNA.Prawdopodo-
bieństwotobędziezależałoodstężeniaDNAiczasudenaturacji.Imwiększejest
stężenieDNA9tymmniejszajestśredniaprzebytadrogakoniecznadospotka-
niainnejcząsteczkiDNA.Imdłuższyjestczastrwaniadyfuzji9tymdłuższajest
średniaprzebytadroga.
NastopieńdenaturacjimawpływsekwencjaDNA.
helisaDNA
rozwinięte
niciDNA
częścioworozwinięta
reasocjacja
helisy
helisaDNA
Rys.1.8.ProcesydenaturacjiireasocjacjihelisDNA