Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
C3.Kulturybakteriiwlaboratorium
25
tyndalizacji,promieniowaniuUV,promieniowaniugamma
oraz-jeślipodłożejestpłynne-filtracji.
Zagadnienia
powiązane
C5.Obserwacja
mikroorganizmów
D1.Analizawzrostu
drobnoustrojów
D5.Laboratoryjnahodowla
okresowa
Podłożahodowlane
Mikrobiologmającyzamiarwyhodowaćdrobnoustrojewlaboratoriummusipodjąć
wieledecyzji.Biomasawprowadzanadopodłożahodowlanegonosinazwęinokulum,
ajedenzpierwszychwyborów,jakichtrzebadokonać,dotyczyrodzajupodłożado
inokulacji:czymabyćonostałe,czypłynne.Podłożewybierasiętak,byodpowia-
dałoźródłuinokulum,którymmożebyćkulturamieszana,złożonazwieluróżnych
gatunkówmikroorganizmów,lubczystakultura,złożonatylkozjednegogatunku.
Podłożastałeumieszczanesązazwyczajwokrągłych,sterylnych,plastikowychpojem-
nikachzpokrywką(szalkachPetriego),azestalajeagar.Zapomocąsterylnejigły
bądźplastikowejezydokonujesięposiewuredukcyjnego,zaśzapomocągłaszczki
posiewupowierzchniowegodanejhodowlidrobnoustrojów.
Mikroorganizmycechująsięniesłychanąróżnorodnościąmetaboliczną(rozdziałyC2,
C5iE4),wobecczegowymagajądostosowanegoskładupodłoża.Niektóreorganizmy
syntetyzująwszystkieskładnikikomórkizprostychźródełwęglaienergii,takichjak
glukoza,adoichwzrostuwystarczypodłożeminimalne(syntetyczne/zdefiniowane).
Podłożetakiezawierasolenieorganiczneazotu,fosforu,siarki,magnezu,potasuoraz
żelazaimożebyćuzupełnionepierwiastkamiśladowymi,takimijakcynk,mangan,
bor
,kobalt,miedź,nikiel,chromczymolibden.Organizmpotrzebujebardzoniewielkich
ilościtychpierwiastków;sąonewykorzystywanejakogrupyprostetycznepewnych
enzymów(np.dehydrogenazaalkoholowazawieracynk).Prawdziwieminimalne
podłożeniezawierażadnychzwiązków,którychorganizmniewymagadowzrostu,ale
jeślidostarczysięorganizmowidodatkowewitaminy,takiejakryboflawina,tiamina,
kwasnikotynowy,pirydoksyna,pantotenianwapnia,biotyna,kwasfoliowyczywita-
minęB
12
,jegowzrostbędziezregułyprzebiegałszybciej.Witaminyrównieżdostar-
czanesąwminimalnychilościach,wystarczającychdoudziałuwsyntezieenzymów,
alenietakdużych,bymogłypełnićrolęźródławęglai/lubenergii.
Podczashodowaniawybranychauksotrofów(rozdziałF3),czylibakteriiwymaga-
jącychnp.aminokwasów,koniecznemożeokazaćsięuzupełnieniepodłożamini-
malnegowszystkimidwudziestomaaminokwasamilubpewnąichgrupą.Jestto
niezbędneczęstowprzypadkupatogenów,któreżyjącworganizmiegospodarza
zwierzęcego,straciłyzdolnośćdosyntezyjednegolubwszystkichenzymówuczest-
niczącychwszlakachsyntezyaminokwasów.Określaniewymagańaminokwasowych
