Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
20
Rozdział1.Genetykamolekularnawekologii
Ryci1i13iDwapierwszecyklereakcjiłańcuchowejpolimerazy(PCR).Pogrubioneczarnelinie
symbolizująoryginalnąmatrycęDNA,krótkieszarekreskitoprimery,aliniezakreskowanetonowo
zsyntetyzowanefragmentyDNA
docelowegoznaczącoprzekroczyilośćwyjściowego,niepowielonegoDNA,aprodukt
końcowyprocedurybędziemożnaopisaćzapomocąkilkumetod,któreprzybliżymy
wdalszejczęścitegorozdziałuiwrozdziale2.
Ilościowareakcjałańcuchowapolimerazy
Jakzaznaczono,PCRwykorzystujesięnajczęściejdogenerowaniadużychilościjednego
lubwięcejdocelowychregionówDNA,którenastępniesąużywanedotworzeniapro-
filigenetycznychosobników,populacjiigatunków.Tyleżejednązrzeczy,którychnie
możnadokonaćzapomocątradycyjnegoPCR,jestoszacowanieilościDNAzawartego
wdanejpróbce.Wynikatozbrakuzależnościmiędzyrozmiaremmatrycynapoczątku
reakcjiailościąDNApowielonegopojejzakończeniu.Wlatach90.XXwiekustworzo-
nojednaktechnikępodnazwą„ilościowareakcjałańcuchowapolimerazy”(qPCRlub
teżilościowareakcjałańcuchowapolimerazywczasierzeczywistym,RTPCR),która
pozwalabadaczomokreślićilośćDNAzawartegowdanejpróbce.
qPCRpozwalajejużytkownikommonitorowaćreakcjęPCR„wczasierzeczywi-
stym”,tojestpodczasjejtrwania,anieczekać,ażwszystkiecyklereakcjiPCRdobiegną
