Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
Komórkipodmikroskopem
13
SUPERROZDZIELCZAMIKROSKOPIAFLUORESCENCYJNA
Zastosowaniekilkunowychipomysłowychtechnikumożliwiłomikroskopomfluores-
cencyjnymprzełamaniestandardowegolimiturozdzielczości200nm.Wjednejztych
technikużywasiępróbkiznakowanejcząsteczkami,którychfluorescencjęmożna
DziękiuprzejmościCarlZeissMicroscopy,LLC
1um
odwracalniewłączaćiwyłączaćlaseramiświecącymiwróżnychbarwach.Próbkajest
następnieoświetlanazestawemdwóchzagnieżdżonychpromienilaserowych.Promień
centralnywzbudzafluorescencjęwmaleńkimobszarzepróbki,adrugipromień–owi-
niętywokółpromieniacentralnego–wygaszafluorescencjęwobszarzeotaczającym.
Spokrewnionepodejścieumożliwiaprecyzyjnemapowanieposzczególnychcząsteczek
fluoryzującychzrównoczesnymwygaszaniemfluorescencjicząsteczeksąsiadujących.
Obapodejściapowolibudująobrazcałejpróbkizrozdzielczościązbliżającąsię
do20nm.Obecniepracujesięnadtym,bynowemetodysuperrozdzielczezastosować
doobrazowania3Didoobserwacjiprzyżyciowychwczasierzeczywistym.
Mikrotubuleoglądanewkonwencjonalnymmikroskopie
fluorescencyjnym(polewej)iwoptycesuperrozdzielczej
(poprawej).Naobraziesuperrozdzielczymmożnawyraźnie
zobaczyćwłaściwerozmiarymikrotubuli,któramatylko25nm
średnicy
TRANSMISYJNA
MIKROSKOPIA
ELEKTRONOWA
DziękiuprzejmościAndrewDavisa
soczewka
obiektywu
próbka
ekran
lubbłona
fotograficzna
soczewka
kondensora
soczewka
projektora
elektronowe
działo
Mikrografiaelektronowa
poniżejukazujemałyfragment
komórkiwcienkimskrawku
jądra.Tkankazostałachemicznie
utrwalona,zatopionawplastiku
ipociętanabardzocienkie
skrawki,którewybarwiono
solamiuranuiołowiu.
DziękiuprzejmościDanielaS.Frienda
0,5um
Transmisyjnymikroskopelektronowy(TEM)jestwzasadzie
podobnydomikroskopuświetlnego,leczzamiastpromienia
światławykorzystujestrumieńelektronów,którychdługośćfalijest
bardzokrótka,azamiastszklanychsoczewekdozogniskowania
strumienia–cewkimagnetyczne.Zpowodubardzokrótkiej
długościfalielektronówoglądanyskrawekmusibyćbardzocienki.
Kontrastjestzwyklewprowadzanyprzezbarwieniepróbek
elektronowogęstymimetalamiciężkimi.Próbkęumieszczasię
następniewpróżniwewnętrzumikroskopu.TEMmaużyteczne
powiększeniedo1milionarazyiwpróbkachbiologicznychmoże
rozróżnićdrobneszczegółyorozmiarachrzędu1nm.
SKANINGOWAMIKROSKOPIA
ELEKTRONOWA
działo
elektronowe
DziękiuprzejmościAndrewDavisa
soczewka
kondensora
deflektor
strumienia
generator
obrazu
soczewka
obiektywu
elektrony
pochodzące
zpróbki
ekran
monitora
detektor
próbka
Wskaningowymmikroskopieelektronowym(SEM)próbka,
pokrytabardzocienkąpowłokąmetaluciężkiego,jestomiatana
strumieniemelektronówogniskowanychnapowierzchnipróbki
przezcewkimagnetyczne,któredziałająjaksoczewki.
Wmiaręjakstrumieńelektronówbombardujekażdypunkt
napowierzchnipróbki,detektorzliczaelektronyrozproszone
lubwyemitowane,auzyskanedanesąwykorzystywanedo
budowaniaobrazunaekraniemonitorapoprzezkontrolowane
określanieintensywnościkażdegopunktuobrazu.Mikroskop
generujezadziwiająceobrazyobiektówprzestrzennychodużej
głębiostrości.Możnazjegoużyciemrozróżnićszczegóły
owielkościpomiędzy3nma20nm,wzależnościodinstrumentu.
DziękiuprzejmościRichardaJacobsaiJamesaHudspetha
1um
Skaningowamikrografia
elektronowastereociliów
wystającychzkomórki
słuchowejwuchu
wewnętrznym(polewej).
5um
Dlaporównaniatasama
strukturapokazanajako
obrazzmikroskopu
świetlnego,nagranicy
jegozdolności
rozdzielczej(poprawej).
