Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
ANALiZAdNA
ROZdZiAŁ
2
Właściwiewszystko,cowiemyogenomachiekspresjigenomów,zostałoodkryte
dziękibadaniomnaukowym:rozważaniateoretycznegrałyniewielkąrolęwtym
czywinnychobszarachbiologiimolekularnejikomórkowej.Możnaposiąść„wie-
dzę”ogenomach,niewiedzącwieleotym,jakwiedzęzdobyto,aleabyosiąg-
nąćprawdziwezrozumienieprzedmiotu,należyszczegółowopoznaćtechniki
ipodejścianaukowestosowanedobadaniagenomów.Kolejnepięćrozdziałów
obejmujetakiewłaśniemetodybadań.Napoczątekwtymrozdzialeprzedsta-
wimymetodywykorzystywanedobadaniaDNA,skupiającsięnareakcjiłańcu-
chowejpolimerazyiklonowaniuDNA.Technikitebardzowydajnedlakrótkich
odcinkówDNA,zpojedynczymigenamiwłącznie,iumożliwiająuzyskanienatym
poziomiewieluinformacji.Rozdział3prowadzinaskumetodomstworzonymdo
konstrukcjimapgenomów.Rozdział4opisujemetodystosowanedosekwencjo-
nowaniacząsteczekDNAidoskładaniakrótkichsekwencjigenerowanychtymi
metodamiwdługiesekwencjestanowiącecałechromosomyigenomy.Nakoniec,
wrozdziałach5i6,przyglądamysięróżnympodejściomwykorzystywanymdo
określenialokalizacjigenówwsekwencjigenomuiidentyfikacjiichfunkcji.
Wtrakcieczytaniatychrozdziałówzacznieciedoceniać,żezrozumieniestruk-
turyifunkcjipojedynczegogenomujestdużymprzedsięwzięciemiżebadania
obecniewpołowieekscytującejfazy,wktórejnowetechnikiipodejściapozwalają
naodkrywanieniemalcotydzieńnowychinieoczekiwanychaspektówgenomów.
Zestawtechnikstosowanychprzezbiologówmolekularnychdobadaniacząs-
teczekDNAzostałskompletowanywlatach70.i80.XXw.Przedtemjedynymspo-
sobembadaniapojedynczychgenówbyłagenetykaklasyczna,wykorzystująca
technikisięgającepołowyXIXw.,czyliczasówMendla.Rozwójbardziejbezpo-
średnichmetodbadaniaDNAstymulowałyprzełomywbadaniachbiochemicz-
nych,którewewczesnychlatach70.dostarczyłybiologommolekularnymenzy-
mównadającychsiędomanipulowaniaDNAwprobówce.Enzymytewystępują
naturalniewżywychkomórkachiuczestnicząwtakichprocesachjakreplikacja,
naprawairekombinacja,którepoznamywrozdziałach15-17.Wceluustalenia
funkcjitychenzymówwieleznichoczyszczonoizbadanokatalizowaneprzez
niereakcje.Biolodzymolekularnizaadaptowalinastępnieoczyszczoneenzymy
jakonarzędziadomanipulacjicząsteczkamiDNAwzgóryzaplanowanyspo-
sób,wykorzystującjedotworzeniakopiicząsteczekDNA,cięciacząsteczekDNA
namniejszefragmentyiponownegoichłączeniawkombinacjenieistniejące
wnaturze(rys.2.1).Temanipulacjetworząpodstawętechnologiirekombino-
waniaDNA,dziękiktórejkonstruujesięnowelubrekombinowane”cząsteczki
DNAzkawałkównaturalniewystępującychchromosomówiplazmidów.
2010EnZYMYSłUŻĄCE
DOMAniPULACJiDnA
2020REAKCJAłAńCUCHOWA
POLiMERAZY(PCR)
2030KLOnOWAniEDnA
kopiowanie
cięcie
geny
rearanżacja
Rys.2.1.Przykładymanipulacji,
któremożnaprzeprowadzić
zcząsteczkamiDnA