Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
4
HISTOLOGIA
TECHNIKAHISTOLOGICZNA
zatapianiasąnierozpuszczalnewwodzie,
tkankiprzedzatopieniemnależyodwodnić
wetanoluozwiększającychsięstężeniach.
Fragmentytkanekinarządówpobieraneze
Pozatopieniuformujesiębloczki,któresię
zwłok(postmortem),wczasieoperacji(in-
kroinaspecjalnymprzyrządziezwanym
traoperationem),lubbędącewynikiembiop-
mikrotomem.Zeskrawkówparafinowych
sjimająnatyledużewymiary
,żenieprze-
usuwasięparafinę,natomiastultracienkie
puszczająświatła,awięcniedająobrazów
skrawkiżywicyepoksydowejoglądasię
podmikroskopem.Wmikroskopiiświetl-
wcałości.Całaproceduraprzygotowania
nejtakiefragmentymusząbyćpokrojone
skrawkówdooglądaniapodmikroskopem
nacienkie,około10Hmskrawki.
trwa2–3dni.
Niekiedyużywasiętakżetzw.półcien-
kichskrawkówogrubości0,5–1,0Hm,naj-
Przygotowanieskrawków
częściejpozatopieniutkanekwżywicach.
Grubośćskrawkówdooglądaniapodtrans-
metodąmrożenia
misyjnym
mikroskopem
elektronowym
Kiedykoniecznejestszybkiewykonanie
niemożeprzekraczać0,1Hm.Niezależnie
skrawków,np.wczasieoperacjichirur-
zatemodrodzajuużywanegomikroskopu
gicznej,stosujesięmetodęmrożeniajako
skrawkitkankowesąpodstawowąformą
alternatywną
do
metody
parafinowej.
preparatu
histologicznego
stosowanego
Fragmentytkanekzamrażasięzapomocą
wbadaniachnaukowychiwdiagnostyce.
rozprężającegosięCO
2(temperaturaoko-
ło–200C)ikroisięnamikrotomiemro-
żeniowym.Metodatadajewynikigorsze
Utrwalaniemateriału
jakościowoniżmetodaparafinowa,alema
histologicznego
dwiezalety:jestszybka(całaprocedura
trwakilkanaścieminut)izachowujetłusz-
Przedskrojeniemmateriałhistologiczny
czeobojętnewtkankach,którewmetodzie
powinienbyćutrwalonychemicznieprzez
parafinowejsąekstrahowanerozpuszczal-
zanurzeniewpłyniezwanymutrwala-
nikamiorganicznymi.
czem.Najczęściejstosowanymiutrwala-
czamichemicznymisąformalinaietanol.
Przygotowaniekomórekintoto
Możnatakżestosowaćutrwalaniefizyczne,
np.zapomocąmikrofal.Utrwalaniestosuje
Komórkiznajdującesięinvivowzawiesinie,
sięwceluzapobieżeniaprocesomautolizy
,
np.komórkikrwiiinnychpłynówciała,
tj.samostrawieniaobumierającychkomó-
niewymagajążmudnejproceduryskrawa-
rek,orazichgnicia.
nia.Możnajeoglądaćpodmikroskopem
świetlnymwcałości(intoto)(rycina1.2).
Komórkizłuszczonezpowierzchniciała,
Przygotowanieskrawków
np.zbłonśluzowych,możnatakżeoglą-
daćintoto.Ztakichkomórekzawieszonych
Fragmentyutrwalonychtkaneksązbyt
wpłynachwykonujesięrozmazy.Analiza
kruche,abymożnajebyłobezpośrednio
komórekzłuszczonychuzyskiwanychzwy-
kroićnacienkieskrawki.Dlategoteżna-
dalinlubbezpośredniozpowierzchniciała
leżyimnadaćodpowiedniąkonsystencję
jestprzedmiotemgałęzidiagnostykime-
przezzatopienie(nasyceniecałejichobję-
dycznejzwanejcytologiąeksfoliatywną.
tości)wparafinie(mikroskopiaświetlna)
Niekiedywcelachdiagnostycznychwyko-
lubżywicyepoksydowej(mikroskopiaelek-
nujesięreplikinarządów.Polegatonaprzy-
tronowa).Ponieważmateriałyużywanedo
tknięciuprzekrojonegofragmentunarządu
