Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
Organizacjagenomu:odnukleotydówdochromatyny
41
Ryc0303Trawieniechromatynynukleaząmikrokokalnąpozwalauwidocznićciągnukleosomów0Chromatynaoraz
DNApozbawionybiałekbyłypoddanetrawieniumałąilościąnukleazyizolowanejzmikrokoków.Następniezobupróbek
usuniętobiałka(wprzypadkupróbyzawierającejsamDNA-nukleazęmikrokokalną),afragmentyDNArozdzielonowżelu
agarozowym(zob.Ramka.Narzędzia.8.6).WidocznadrabinkafragmentówDNAwprzypadkutrawieniachromatynyukazuje
różnicewichdługościostałąwartośćrównąodcinkowiDNAnawiniętemunapojedynczynukleosom(krotnośćdługości
fragmentówDNAwynosi180pz).Drabinkęfragmentówobserwujemytylkozewzględunapodaniedoreakcjitrawieniamałej
ilościnukleazy,stądtrawienieDNAjestniekompletne.Wyczerpującetrawieniedoprowadziłobydorozcięciawszystkich
rejonówDNAłącznikowegoiutworzenianukleosomalnychcząstekrdzeniowychijednegofragmentuDNAodługości
~147pz.TrawienieomawianąnukleaząDNApozbawionegobiałekprowadzidootrzymaniacałegozakresufragmentóworóżnej
długości,widocznychjakosmuganażelu,ponieważcząsteczkiDNAniesąchronioneprzedtrawieniemnukleaząidostępne
dlaenzymuwkażdymmiejscu.(Reprodukowanoz:Wolffe,A.1998.Chromatin.Structureandfunction.ThirdEdition.Academic
Press,NewYork,Copyright©1998,zazgodąElsevier.)
Paciorkinanizanenasznurek:chromatyna(włókno)10nm
Prawie30lattemuPierreChambonwrazzewspółpracownikamiopublikowałzastanawiającąmikrografięelektro-
nowągenomueukariotycznego.Zdjęciatewyraźnieukazywałyobecnośćtejsamejwielkościcząstek,równoodda-
lonychodsiebie,przypominającychpaciorkinanizanenasznurek.Takiepaciorkiwskazywanojużwcześniej
nazdjęciachomniejszejrozdzielczościobrazu.W1939r.AmramScheinfeldwksiążcezatytułowanejYouandHe-
reditynapisał:D…wpewnychokresachchromosomymogąsięrozciągaćdoformybardzodługichwłókien.Obser-
wujemywtedy,żewłóknatezbudowanesązwielugalaretowatychpaciorkówpozostającychzesobąwścisłymkon-
takcie.Paciorkitealbosą»genami«,albojezawierają…”.
Obrazpaciorkównanizanychnasznurekmożnazobaczyćstosującmikroskopięelektronową.Tworzągowłók-
naośrednicy10-11nm,auzyskaćjewtejformiemożnastosującdoizolacjimałestężeniesoli(ryc.3.2).Paciorkitonic
innegojakDNAnawiniętywokółoktameruhistonówrdzeniowych,asznurektodwuniciowahelisaDNA.Histonłącz-
nikowyniejestpotrzebnyprzytymstopniuupakowaniaDNA.Ponieważuzyskanietakiegomateriałuodbywasięwwa-
runkachniefizjologicznych,pozostajezatempytanie,czywłókna10-11nmwystępująinvivo,czyteżsątylkoefektem
stosowanejproceduryizolacyjnej.
