Treść książki

Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
dlawszystkichchoróbgenetycznychispecyficzną
dlanichjestbadaniemateriaługenetycznegometoda-
micytogenetykiibiologiimolekularnej,wzależności
odrodzajuchorobygenetycznej.
20501
Diagnostykacytogenetyczna
Lekarzreumatologrzadkomadoczynieniazpa-
cjentemzaberracjąchromosomową.Problematykata
zostaniezatemprzedstawionaskrótowo,aleniemoż-
najejpominąćprzyomawianiustrategiibadańgene-
tycznych.Możesięrównieżzdarzyćsytuacjazłożo-
na,kiedyopróczchorobypodstawowej,zpowodu
którejpacjentjestobjętyopiekąreumatologa,ucho-
regowystępujepatologiazwiązanazaberracjąchro-
mosomową,np.niepełnosprawnośćintelektualnaczy
niepowodzeniarozrodu.Ponadtojedenzkierunków
poszukiwaniagenów,którychmutacjeipolimorfizmy
stanowiąpodłożegenetycznechoróbuwarunkowa-
nychwielogenowo,poleganabadaniudużychgrup
nosicielitranslokacjizrównoważonychiinwersjipod
kątemwystępowaniauosóbzdanąaberracjąchro-
mosomowąchoróbuwarunkowanychwielogenowo.
Przesłankądoprowadzeniatychbadańjestzałożenie,
żewniektórychprzypadkachwmiejscuzłamania
chromosomumożeprzypadkowodojśćdouszkodze-
niazlokalizowanegotamgenu,costworzypredyspo-
zycjęgenetycznądorozwojuchoroby.Analogicznie
wielegenówdlachoróbjednogenowychudałosię
sklonowaćdziękitemu,żewpunkciepęknięciachro-
mosomuznajdowałsięgen,któryuległprzytym
uszkodzeniu.
Diagnostykaaberracjichromosomowychopiera
sięnabadaniukariotypu.Jakwspomnianowcześniej,
chromosomyjakocharakterystyczneimożliwedo
ocenystrukturywidocznetylkowstadiummetafa-
zypodziałukomórkowego,dlategodobadaniakario-
typusłużąkomórkidzielącesięspontanicznielub
mogąceulecstymulowanympodziałom.Standardo-
wobadaniekariotypuwykonywanejestnalimfocy-
tachkrwiobwodowej,którestymulujesiędopodzia-
łówinvitrododanądohodowlifitohemaglutyniną.
Niekiedybadasięinnekomórki(np.fibroblasty),
awdiagnostyceprenatalnejamniocytylubkomórki
trofoblastu.Dookreśleniakariotypunapodstawie
limfocytówpotrzebaokoło2–3mlkrwiobwodowej
pobranejnaheparynę.Hodowlalimfocytówtrwa72
godziny,następniezostajeonazakończonaiwykony-
wanepreparatycytogenetyczne.Nachromoso-
machuzyskiwanyjestodpowiedniwzórprążkowy
(zwykleGTG,tj.uzyskiwanyprzeztrawieniechro-
mosomówtrypsynąibarwieniebarwnikiemGiemsa).
Ocenakariotypuobejmujeokreślenieliczbychromo-
somówwwybranychpłytkachmetafazowychoraz
analizęwzoruprążkowegochromosomówwceluwy-
krycialubwykluczeniaaberracjistrukturychromoso-
mów.Badaniekariotypujestwieloetapowe,przepro-
wadzaneprzezodpowiedniowyszkolonypersonel
(cytogenetyków).Aktualniewoceniekariotypuispo-
rządzaniudokumentacjicytogenetykawspomagają
programykomputerowe,coprzyspieszaprocesoce-
niania,aleniezastępujedoświadczeniazawodowego
ibiegłościwocenieaberracjistrukturychromoso-
mów.
Wskazaniadookreśleniakariotypu:
zpodejrzenieokreślonejaberracjichromosomów
(np.zespołuDowna,zespołuTurneranależyza-
wszepotwierdzićpodejrzeniekliniczne);
zfenotypwskazującynabliżejnieokreślonąaberra-
cjęchromosomową;
zniepowodzeniarozrodu:niepłodność,poronienia
samoistne,porodymartwe,zgonydziecizwada-
mi;
zzaburzeniaróżnicowaniapłci;znacznyniedobór
wzrostuufenotypowychkobiet;
zniepełnosprawnośćintelektualna;
zzespołyzłamliwościąchromosomów;
zwdiagnostyceprenatalnejpodwyższoneryzyko
wystąpieniaaberracjichromosomowejupłodu.
Niemawskazańdobadaniakariotypuwprzypad-
ku
chorób
uwarunkowanych
jednogenowo,
ale
wpraktycewskazaniadobadaniakariotypunieco
rozszerzoneiwwieluprzypadkachpodejrzeniaze-
społuuwarunkowanegojednogenowobadaniekario-
typu,którewykluczaaberracjęchromosomową,jest
pomocnewpotwierdzeniurozpoznania.
Badaniecytogenetycznenależydobraćpodkątem
sytuacjiklinicznej,awynikinterpretowaćindywidu-
alnie.Wprzypadkachaberracjichromosomowych
trudnychdowykrycialubokreśleniatechnikamicy-
togenetykiklasycznejnieodzownajestfluorescencyj-
nahybrydyzacja(FISH)insitu.Fluorescencyjnahy-
brydyzacjałączymetodyklasycznejcytogenetyki
ztechnikamibiologiimolekularnejstądtakżena-
zwancytogenetykamolekularna”.Metodatapolega
natym,żenapreparatcytogenetyczny(chromosomy
lubjądrainterfazoweutrwaloneirozłożonenaszkieł-
kupodstawowym)nakładasięsondęmolekularną
(ewentualniewielesondjednocześnie),dobranąści-
śledoprzypadkuklinicznego.Sondajestznakowana
fluorochromemipojejspecyficznejhybrydyzacjido
chromosomowegoDNAmożnanastępnieobserwo-
waćmiejscehybrydyzacjiwmikroskopiefluorescen-
cyjnym.Metodata,znacznieczulszaniżklasyczne
technikicytogenetyczne,pozwalanawykrywanie
submikroskopowych
aberracji
chromosomowych
iumożliwiawłaściwerozpoznaniecytogenetyczne
wprzypadkach,wktórychzawodzątechnikicytoge-
GENETYKAWREUMATOLOGII45